单细胞测序技术正在革命性地推动我们对生命复杂性的认知，然而其高昂的每样本成本和技术复杂性，限制了其在更多实验室和更广泛物种中的普及。尽管多重样本标记技术能有效“降本增效”，但现有的方法往往受限于表面抗原鱼类特女性朋友、寡核苷酸呈现直接费用高价或运行步奏复杂化。近日，南方海洋科学与工程广东实验室（广州）的陈凯讲师专业团体在Journal of Genetics and Genomics上发表了一项创新性方法学研究，提出了一种名为HEATag的新型样本标记策略，为我们提供了一个低料工费、跨植物物种、全服务平台兼容的全新解决方案。

刊物介绍

Journal of Genetics and Genomics (JGG)是由国地理实训基地隐性基因与健康海洋生态学论述所和国隐性基因自学举办单位的国.际科研界杂志论文期刊论文杂志，着力推进于报导人的一生地理学和医药学隐性基因学的研究方向的原作者性论述科研成果。JGG 2028年度直接影响指数公式7.1，Scopus科研界杂志论文期刊论文杂志评定指标体系CiteScore 9.9，跃居JCR 2028年度GENETICS & HEREDITY的研究方向Q1区(Top 10%)，BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY的研究方向Q1区，跃居国地理实训基地杂志论文期刊论文杂志划分海洋生态学几类1区(Top杂志论文期刊论文杂志)，隐性基因学和生化学与分子结构海洋生态学小类双1区。

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什么样的是HEATag

完美的“二合为一体”规划

HEATag是由凝集素和HUH内切酶组合而成的融为一体淀粉酶

「手机定位器」板块 - 凝集素

能够识别细胞膜上广泛存在且高度保守的糖基化绘制（如GlcNAc和Neu5Ac）。

「连结器」传感器 - HUH内切酶

可以序列特异性地与普通的、无需化学修饰的单链DNA（ssDNA）数据库索引长条码开始共价拼接。

“1+1>2”的视觉效果：将两者融合，得到的HEATag蛋白既能通过凝集素牢牢锚定在细胞膜上，又能通过HUH蛋白携带特定的DNA条形码进行范本标出与追根。

Fig1: HEATag丰富标签远离关心图

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实用技巧检测

HEATag那么到底有能开打？

不错在有差异必要条件下，建立喂奶部分动物血受损细胞系单血受损细胞混样测序

实验室里的设计再精妙，也要经过真实样本的 “实战考验” 才算数。调查开发团队为 HEATag 装置了多轮 “负担测试英文”，从神经元系到神经元核，从恒温的到高温，从新鲜模本到固定的模本，全方向位置印证它的稳定可靠性设计和稳定可靠性设计。

第二轮测式争对辅乳部分动物細胞系：探讨人工选用了发源人、鼠、仓鼠三种植鱼类类的两种細胞（HEK293T、K562、MEF、CHO），在空调温度下能 HEATag 箭头后混合式测序。从而回报的 11447 个細胞中，85.66% 都能根据 HEATag 条状码准确度适合到原植鱼类类，范本间交叠破坏特少，UMAP 聚类浅析浅析更多的是会直接证明文件，HEATag 条状码与植鱼类类特情人DNA组特证长度一直。 继续，检测前提进一次提升：研究探讨工作人员勇于尝试在 4℃下标识鲜美的生殖上皮血血細胞、在空调温度下标识甲醇紧固生殖上皮血血細胞，恐怕能否直接标识生殖上皮血血細胞。可是还是出众：其它前提下，模板产品标签与植物物种企业信息均体现了非常不错的关联性，切分准确性率超 95%。纵然甲醇紧固会导致略微的转录本相交被污染，生殖上皮血血細胞化学合成能有少量出 RNA 流失量，生殖上皮血血細胞多种类型的注脚可是还是与鲜美的模板长期保持共同，关系证明 HEATag 能否标识各个加工处理前提下的实验报告模板。

Fig2: HEATag 可在不一样前提条件下实现单神经元转录组混样研究

也能标识辅乳猎物和大海无脊椎骨猎物的原代肿瘤细胞

假若说组织细胞膜系检查是 “基本知识题”，那组建范本只是 “追加题”， 这么多范本并不因组织细胞膜内型更复杂、室内环境适用于性比较特殊，加入记号技术工艺的 “困难”，而 HEATag 正好在这么多 “困难” 上表现了优势。

研究团队选择了大鼠和小鼠的睾丸集体，这类样本包含精原干细胞、精母细胞、精子细胞等多种类型，对标记一致性的要求极高。实验中，两种动物的睾丸用特异性 HEATag 条形码标记后混合测序，最终获得的 14663 个细胞不仅仅能被精确性辩别，所以首要组织款式的聚类分析法数据都流畅可辨。

更令人惊喜的是HEATag对浅海生态学的自适应性。HEATag能在海水的等渗溶液中标记新鲜的海洋动物细胞（如海月水母、大西洋海刺水母）。研究人员用人工海水稀释的HEATag 标记了水母和珊瑚的组织细胞后在 BD Rhapsody 平台测序，最终回收的 6452 个细胞中，HEATag 长条码与动物群转录组还具有较高一直性，沒有展现因高盐氛围出现的 “标示没有效果”。后续对甲醇固定的海洋生物细胞测试结果显示，HEATag 在固定样本中的拆分效果优于新鲜样本。

Fig3: HEATag 可达到母乳喂奶软体动物团队模本多种 scRNA-seq 研究

Fig4: HEATag可做到清新海域无脊梁骨哺乳动物许多 scRNA-seq 分享

HEATag与体细胞的通过不要使得转录组的同质性改动

对样本标记技术来说，“不影响样本本身的 RNA 特征” 是底线。研究团队将来自同一供体的等量的 HEATag 标记细胞与未标记细胞混合测序，对比两者的 RNA 质量、基因捕获数量和细胞组成。结果显示，标记组与未标记组的 RNA 质量没有明显差异，捕获的基因数量基本持平，UMAP 图谱显示两组样本的细胞组成高度相似，转录相似性更是维持在高位。无论是细胞簇的注释结果，还是不同细胞类型的基因回收数量，两组都几乎一致，没有出现 “标记导致的基因表达异常”。这意味着，HEATag在结束箭头任務的互相，不容易对事件的转录酚类化合物析有干拢，保护了的研究数据分析的真實性。

Fig5: HEATag并不会干扰样品的 RNA 表达爱玩法

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未來可期

HEATag 能为单肿瘤细胞探讨引发哪些？

HEATag 的價值，远不是只有于 “解决方法标志的问题”，它的灵活多变性和共通性，未能为单人体细胞探究张开太多将会性

从app场地分析

HEATag 能盖住从 “简短比效解析”（如癌阻止与普通 阻止、用药除理与比较）到 “大产值探析”（如阻止神经体细胞图谱绘制图、mtk量具体需求）的全的范围具体需求。如今 PIP-seq、Stereo-cell 等新型的可扩充技術的经济发展，HEATag 还能进一大步发展单神经体细胞探析的通量，助推器教育科研技术团队开设挺大产值的创业项目。

从跨的领域价值看来

HEATag 这不仅使使用于转录组学，还能与表观基因遗传组学、球核苷酸组学、面积组学等新的技术融于，确认定制开发指数和寡核苷酸字段，HEATag 能否轻轻松松融于不相同的组学具体流程，不反应4g信号捕捉纵深。同样，立于HEATag还能否的发展单内部糖组学实验新的技术。

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合伙各式各样

拜谱生物学与陈凯博士生导师确定首次合作协议意向书

划得来注重的是，在 HEATag 工艺能够 出惊人工艺技术应用实力的蓝本下，拜谱菌物已与我国南部大海合理与公程四川科学试验室（苏州）陈凯硕士生导师形成总体战略合作的想法。两者年度计划努力实现 HEATag 工艺的房产化半空、教学科技课题导出等目标刺激性深度的优势互补，推进这成本分析投入、跨鱼类的单体肿瘤细胞核标记符号工艺较快工艺技术应用于实计教学科技课题景象，为很多科学试验室保证高效率、国家经济的单体肿瘤细胞核深入分析工具软件，力助教学科技课题工做者在体肿瘤细胞核菌物学、大海菌物学、慢性病规则等领域拿到很多攻克